臨床基因擴增（PCR）實驗室設計規(guī)范

一、實驗室布局與功能分區(qū)

1. 四區(qū)獨立設置

• 試劑準備區(qū)：負責試劑分裝、貯存及反應混合液制備，需保持正壓（+5~10Pa），防止外界污染。

• 標本制備區(qū)：進行樣本核酸提取、加樣，需保持負壓（-10Pa），配備生物安全柜，避免氣溶膠擴散。

• 擴增區(qū)：執(zhí)行DNA/cDNA擴增，負壓環(huán)境（-15Pa），使用核酸擴增儀，電源需配備穩(wěn)壓裝置。

• 產(chǎn)物分析區(qū)：負責擴增產(chǎn)物檢測，為最高負壓區(qū)（-20Pa），防止產(chǎn)物外泄污染其他區(qū)域。

2. 靈活區(qū)域合并

• 采用實時熒光PCR法時，擴增區(qū)與分析區(qū)可合并。

• 使用全自動化分析儀時，標本制備、擴增及分析區(qū)可整合為一個區(qū)域。

3. 單向流程控制

• 人員、物料及氣流需嚴格遵循單向流動：試劑準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增區(qū)→產(chǎn)物分析區(qū)。

• 各區(qū)間設置緩沖間，安裝連鎖裝置，避免交叉污染。

二、空調(diào)通風與壓力控制系統(tǒng)

1. 全送全排氣流組織

• 采用全新風系統(tǒng)，避免氣流回溯，送排風比例需精確控制以維持壓力梯度。

• 排風口設于污染風險最高區(qū)域（如生物安全柜上方），采用上送下排方式，減少渦流。

2. 壓力梯度設計

• 試劑準備區(qū)：+5~10Pa（正壓），防止外部氣溶膠侵入。

• 標本制備區(qū)：-10Pa（負壓），保護人員及樣本。

• 擴增區(qū)：-15Pa（負壓），降低氣溶膠外泄風險。

• 產(chǎn)物分析區(qū)：-20Pa（負壓），作為主要污染源區(qū)域，需嚴格隔離。

三、污染防控核心措施

1. 物理隔離與設備專用

• 各區(qū)設置緩沖間，安裝連鎖裝置，防止兩門同時開啟。

• 微量加樣器、離心機等設備分區(qū)專用，避免交叉使用。

• 傳遞窗用于試劑及樣本傳遞，減少人員流動。

2. 消毒與清潔規(guī)范

• 實驗結束后，立即對工作區(qū)表面擦拭消毒，設備定期高壓滅菌。

• 每次高壓滅菌需驗證消毒效果，并保存記錄。

• 廢液及吸頭需經(jīng)消毒液浸泡后統(tǒng)一處理，禁止在實驗室內(nèi)傾倒。

3. 氣溶膠控制

• 標本制備區(qū)及擴增區(qū)操作盡量在生物安全柜內(nèi)進行。

• 避免在擴增區(qū)內(nèi)不必要的走動，減少氣溶膠產(chǎn)生。

四、安全規(guī)范與配套設施

1. 生物安全要求

• 實驗室需達BSL-2標準，配備生物安全柜、高壓滅菌鍋、洗眼器等設備。

• 設置門禁系統(tǒng)，非授權人員禁止入內(nèi)，實驗人員需經(jīng)培訓并登記。

2. 應急措施

• 制定污染、火災等應急預案，配備急救箱、滅火器，并定期演練。

• 擴增產(chǎn)物分析區(qū)需注意化學試劑安全防護，避免基因突變或有毒物質(zhì)暴露。

3. 監(jiān)測與記錄

• 安裝溫濕度、壓力傳感器，實時監(jiān)控環(huán)境參數(shù)。

• 保存消毒、設備維護記錄，定期進行生物安全風險評估。

五、裝飾裝修材料要求

1. 圍護結構

• 墻面、地面需平整、耐腐蝕、易清潔，陰陽角采用圓弧過渡。

• 地面材料推薦PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪，無縫設計減少積塵。

2. 照明與通風

• 使用凈化燈具，避免積塵。

• 排風系統(tǒng)獨立設置，防止倒灌，確保氣流定向流動。

六、特殊場景適配

1. 樣本粉碎處理

• 需增加獨立區(qū)域進行樣本粉碎，避免交叉污染。

2. 自動化設備整合

• 使用全自動化PCR分析儀時，可合并標本制備、擴增及分析區(qū)，但需確保氣流單向性。

結語
臨床PCR實驗室設計需兼顧功能分區(qū)、氣流控制、污染防控及安全規(guī)范，通過科學合理的布局與嚴格的流程管理，確保實驗結果的準確性和人員安全。